biorad电泳槽(biorad电泳槽 预制胶)
今天给各位分享biorad电泳槽的知识,其中也会对biorad电泳槽 预制胶进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!
伯乐Bio-Rad小垂直板电泳槽如何操作
先用制胶架做胶,上层浓缩胶,下层分离胶。然后把胶板拿下来,放到电泳槽的配套夹子里,加缓冲液,电泳,其实电泳还是有很多注意事项的,有个好办法就是打电话叫伯乐公司的人来教你怎么用,这样能教的清楚些。
[img]我要用SDS-PAGE凝胶电泳测蛋白酶分子量,但是不知道买什么型号的,推荐一下,大概要多少钱,越具体越好。
需要 电泳槽一套(含置胶板,几组玻璃,梳子等),电泳仪一个。如果有跑DNA的电泳仪是可以通用的。
资金充裕的话选择bio rad的电泳槽吧,比较常用的是mini3
否则可以选择北京六一的。印象中六一的好像一套下来三四千的样子。
如果你就想看看分子量,而不是要转膜, WB之类的,没必要太好的。具体报价什么的如果你在高校或者科研所都很容易找到设备经销商的,他们给买会很方便,也比直接从官方买便宜些。或者找所在城市的一些供应商,免了广告嫌疑,就不列举了。
现在新的电泳系统是有带成像系统的,甚至可以一边跑一边成像,不过要几万呢,而且毫无必要。你估算分子量的话用相机照一下胶然后用画图或者ps的标尺量就行了。
请教bio-rad 电泳仪使用
电泳仪使用方法可参考:
1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。
2.电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。
3.接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。
4.工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态,并拨出电泳插头。
为什么我在等电聚焦前加的矿物油在聚焦后会减少,暴露出了胶条的背面?
这是因为 BioRad 的电泳槽有个盖子。为了固定电泳槽中的胶条,这个盖子上设计了对应的突起,以便压住胶条。由于虹吸作用,这个突起会导引矿物油到相邻的空电泳槽,从而降低有胶条的电泳槽中的矿物油液面。如果由此把胶条暴露在空气中,那对等电聚焦的影响将是毁灭性的。为了防止这个现象的发生,可以在相邻的空电泳槽里,也加入适量( 80 %满)的矿物油。 生物帮上面有这方面的专题知识, 微生物学,细菌,病毒,真菌 。
biorad报错e6
报错e6意思是:电流突变(可能插拔了一个负载)。切断电源后重新开机,建议不要在电泳仪运行是插拔电泳槽。
RT-PCR实验案例解析—钟鼎生物
钟鼎生物技术公司基于与客户合作的实际案例,介绍了RT-PCR的实验流程,包括RT-PCR实验所需试剂耗材、RNA提取、RNA反转录为cDNA。
实验摘要
使用TRIzol提取样品总RNA,反转录获得cDNA,供下游实验使用。
1.试剂与耗材
试剂与耗材
Prime Script II 1st Strand cDNA Synthesis Kit,宝生物工程(大连)有限公司,6210B;总RNA提取试剂TRIzol,南京钟鼎生物技术有限公司,RK01-100;
DL2000 DNA Plus Marker(100、250、500、750、1000、1500、2000 bp),南京诺唯赞生物技术有限公司,MD101。GelStain,北京全式金生物技术有限公司,GS101-01;
DEPC,Sigma公司,D5758-25ML;Agarose,西班牙Biowest,91622;
离心管,美国Axygen,311-01-051;枪头,美国Axygen;
其它试剂均为国产分析纯。
2.主要实验仪器
主要实验仪器
超微量紫外分光光度计:NanoDrop2000,Thermo公司;台式高速冷冻离心机,美国BECKMAN公司,Allegra 21R;
电子天平,美国AHOMS公司,AR5120;紫外透射仪,美国Amersham Pharmacia公司,Hofer MV-25;
电泳仪:TY2795型,BIO-RAD公司;电泳槽:Sub-Cell GT Cell,BIO-RAD公司;
凝胶成像分析系统:GelDocXR型,BIO-RAD公司;雪花状制冰机,日本SANYO公司,SIM-F140AY65;
移液器,德国Eppendorf公司。
3.实验方法及结果
3.1.RNA提取
(1)组织匀浆:向样品中加入1 ml TRIzol试剂(组织块体积不要超过TRIzol体积的10%),用移液器反复吹打。
(2)将上述匀浆液室温放置5 min,待核酸和蛋白充分解离。每1 ml TRIzol试剂用量的匀浆液中加入0.2 ml氯仿,盖紧管盖,手动剧烈震摇15 s,然后室温静置2~3 min。
(3)4℃ 10,000 g,离心10 min。
(4)小心吸取上层水相(无色)加入到新试管中,同时计算所吸取的水相体积。
(5)加入所吸取水相等体积预冷的异丙醇,盖紧管盖,轻轻摇匀。
(6)室温静置10 min,待RNA充分沉淀。
(7)4℃ 10,000 g离心10 min。
(8)将上清弃除(注意别丢弃沉淀),每管加入1 ml 75%乙醇润洗,盖紧管盖,轻轻晃动离心管,以去除残留的异丙醇和盐份。4℃ 7,500 g离心5 min。
(9)将上清弃除,打开管盖,将RNA 沉淀干燥(室温挥发或真空干燥)。注意RNA沉淀不可完全干燥,否则难以溶解。
(10)将RNA沉淀溶解于适量的无RNase水中。
3.2.RNA琼脂糖凝胶电泳分析
提取好的RNA进行琼脂糖凝胶电泳,电泳图如下所示:
3.3.RNA浓度及纯度测定
3.4.RNA反转录为cDNA
3.4.1.基因组DNA去除
采用钟鼎公司的DNase I,在RNase free的离心管中配制如下混合液:
3.4.2.反转录反应
在PCR管中配制下列反应混合液:
65℃反应5 min,冰浴冷却。
在第一步的反应管中配制下列反转录反应液:
反转录反应条件的设置:30℃ 10 min,42℃ 30 min,95℃ 5 min。冰浴冷却。产物至于-20℃冰箱保存。
您与SCI只缺一个:《 RT-PCR技术服务 》
钟鼎生物官网
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